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微生物薄膜過濾法計數(shù)結果是如何計算的

作者:恩計儀器小編 時間:2025-07-30 08:52:34 點擊:135 次

微生物薄膜過濾法的計數(shù)結果計算主要基于微生物限度檢測儀的濾膜上截留的微生物菌落數(shù),結合過濾體積和稀釋倍數(shù)進行推算,核心公式為:
CFU/mL=濾膜上菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)/過濾體積(mL)

具體計算步驟與注意事項如下:

一、計算步驟

  1. 菌落計數(shù)

    • 培養(yǎng)結束后,統(tǒng)計濾膜上的菌落數(shù)。

    • 關鍵要求:選擇菌落數(shù)在30-300之間的平板進行計數(shù),以確保結果準確性。若菌落數(shù)過多(如超過200個),需重新稀釋樣品并過濾。

  2. 確定稀釋倍數(shù)

    • 若樣品在過濾前進行了稀釋(如將10mL樣品加入90mL無菌水中,稀釋倍數(shù)為10倍),需記錄稀釋倍數(shù)。

    • 若未稀釋,稀釋倍數(shù)為1。

  3. 計算微生物濃度(示例)

    • 過濾體積:100mL

    • 稀釋倍數(shù):10倍

    • 濾膜上菌落數(shù):124個

    • 計算:
      CFU/mL=100124×10=12.4CFU/mL

    • 若需計算每升樣品中的微生物數(shù)量,則乘以1000:
      12.4×1000=12400CFU/L

    • 將菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù),再除以過濾體積(mL),得到每毫升樣品中的微生物數(shù)量(CFU/mL)。

微生物限度儀.jpg

二、特殊情況處理

  1. 菌落蔓延生長

    • 若菌落蔓延成片,無法區(qū)分單個菌落,則該平板不宜計數(shù),需重新實驗。

  2. 稀釋級平行性要求

    • 若同稀釋級兩個平板的菌落平均數(shù)不少于15,則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上,否則需重新實驗。

  3. 延長培養(yǎng)時間

    • 霉菌、酵母菌培養(yǎng)時間可延長至5-7天,以充分生長并計數(shù)。

三、結果報告

  1. 報告內容

    • 檢測方法(如薄膜過濾法)、樣品信息、培養(yǎng)條件(溫度、時間)、菌落數(shù)及結論(是否符合微生物限度標準)。

  2. 標準對比

    • 根據藥典或行業(yè)標準(如中國藥典、美國藥典),判斷樣品是否合格。

    • 示例:若標準要求每毫升樣品中微生物數(shù)量不超過100CFU,則上述計算結果(12.4 CFU/mL)符合標準。

微生物限度儀5.jpg

四、操作要點

  1. 無菌操作

    • 確保過濾、培養(yǎng)等環(huán)節(jié)無菌,避免污染。

  2. 濾膜選擇

    • 根據微生物大小選擇合適孔徑的濾膜(如0.45μm)。

  3. 沖洗濾膜

    • 使用無菌緩沖液沖洗濾膜,去除殘留雜質和微生物抑制劑。

  4. 培養(yǎng)基選擇

    • 根據微生物類型選擇適宜的培養(yǎng)基(如營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基)。


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